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      蘇木素伊紅混合染色液(一步法)

      發布時間:2022-01-06

      蘇木素伊紅混合染色液(一步法)

      簡介:

      蘇木素(Hematoxy1in)和伊紅(Eosin)聯合染色,簡稱HE染色,是病理學常規制片中最基本的染色方法,應用極其廣泛。蘇木精是從原產中南美的洋蘇木中提取出來的淺黃褐色的結晶,是- -種堿性染色劑,它在被氧化后生成蘇木素,同媒染劑(常用的是三價的鋁或鹽鐵)一起使用,能夠使細胞核色。在病理診斷、教學和科研工作中,常用HE染色對正常組織和病變組織進行形態結構觀察。在HE染色的組織切片中,細胞核呈藍色,i細胞漿呈紅色,二者形成鮮明的對比,易于觀察分析。

         Leagene蘇木素伊紅混合染色液是把蘇木素和伊紅混合在一起,只需對細胞、組織等樣本染色一次,既能使蘇木素上色亦可使伊紅上色的新型染色液,可用于染色樣本的類型有石蠟切片、冰凍切片、血液涂片、培養細胞以及體液涂片(如宮頸粘液涂片、腦脊液涂片等)等,本產品尤其適用于血液涂片和體液涂片染色。

       

      染色原理:

      1、 細胞核染色的原理:

      蘇木素為堿性天然染料,可使細胞核著色。細胞核內染色質的成分主要是DNA,在DNA雙螺旋結構中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使DNA雙螺旋的外側帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍色,所以細胞核被染成藍色。

      2、細胞漿染色的原理:

      伊紅是一種化學合成的酸性染料,在一定條件下可使細胞漿著色。細胞漿的主要成分是蛋白質,為兩性化合物,細胞漿的染色與染液的pH值密切相關。當染色液pH值在胞漿蛋白質等電點(4.7~5.0)以下時,胞漿蛋白質以堿式電離,則細胞漿帶正電荷,就可被帶負電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負電荷的陰離子,與胞漿蛋白質帶正電荷的陽離子結合,使細胞漿著色,呈現紅色。

      3、分化作用:

      染色后,用某些特定的溶液將組織過多結合的染色劑脫去,這個過程稱為分化作用,所用的溶液稱為分化液。在HE染色中常用鹽酸乙醇作為分化液,因酸能破壞蘇木素的醌型結構,使組織與色素分離而退色。大多數組織經蘇木素染色后,必須用1%鹽酸乙醇分化,使細胞核過多結合的蘇木素染料和細胞漿吸附的蘇木素染料脫去,再進行伊紅染色,才能保證細胞核與細胞漿染色的分明。

      4、返藍作用:

      分化之后,蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態,呈紅色;在堿性條件下處于藍色離子狀態,呈藍色。組織切片經酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色,立即用水除去組織切片上的酸而中止分化,再用弱堿性水使蘇木素染上的細胞核呈現藍色,這個過程稱為返藍作用或藍化作用。另外用自來水浸洗也可使細胞核返藍,但所需:時間較長。

       

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      1、鹽酸乙醇分化液

      2、藍化液,如稀氨水、碳酸鋰溶液等

      3、系列乙醇

      操作步驟(僅供參考):

      1、切片預處理:取血液涂片或體液涂片置于乙醇固定,用蒸餾水水洗。

      2、蘇木素伊紅混合染色液滴染。

      3、水洗。

      4、用鹽酸乙醇分化,水洗。

      5、用碳酸鋰水溶液返藍,水洗。

      6、封片,光學顯微鏡下觀察、拍照。

      染色結果:細胞核呈藍色;細胞質呈紅色。

      注意事項:

      1、 切片脫蠟應盡量干凈。系列乙醇應經常更換新液。

      2、鹽酸乙醇 分化時間應根據細胞涂片的具體情況而定。

      3、藍化液常使用 0. 2~ 1%氨水或Scott促藍液或0. 1~ 1%碳酸鋰溶液。

      4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性 手套操作。

      有效期: 12 個月有效。.

       

       

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