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DNA病毒基因組提取試劑盒
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| 貨號(hào) | 規(guī)格 | 貨期 | 庫(kù)存 | 價(jià)格 | 促銷(xiāo)價(jià) | 訂購(gòu) |
| 1308111133-50T | 現(xiàn)貨 | 0 | ￥600 | |||
| 1308111133-100T | 現(xiàn)貨 | 0 | ￥1100 |
| 別 名 | |
| Cas號(hào) | |
| M D L | |
| 分子式 | |
| 分子量 | |
| 產(chǎn)品參數(shù) | 產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
本試劑盒適合于從血清、細(xì)胞上清、淋巴液中提取DNA病毒基因組，不適合于RNA病毒基因組的提取。使用本試劑盒提取的基因組DNA可用于各種常規(guī)操作，包括酶切、PCR、文庫(kù)構(gòu)建、Southern雜交等實(shí)驗(yàn)。 操作步驟： 使用前請(qǐng)先在漂洗液中加入無(wú)水乙醇，加入體積請(qǐng)參照瓶上的標(biāo)簽。所有離心步驟均為使用臺(tái)式離心機(jī)在室溫下離心。 1、 取病毒上清液0.5ml，12000rpm離心5min，盡量吸盡上清使用，棄去沉淀。 2、 向病毒上清中加入20ul的蛋白酶K（10mg/ml），充分混勻，65℃消化10-20min，期間可顛倒離心管混勻數(shù)次。 3、 向管中加入500ul結(jié)合液，充分混勻。再向管中加入400ul無(wú)水乙醇，充分混勻，此時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀，不影響DNA的提取，可將溶液和絮狀沉淀都加入吸附柱中，靜置2min。（吸附柱的最大容積為750ul，可分兩次加入。一次吸附完離心后再將余下的混合液體加入柱中靜置離心。） 4、 12000rpm離心2min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。 5、 向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇)，12000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。 6、 向吸附柱中加入600ul漂洗液，12000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。 7、 12000rpm離心2min，將吸附柱置于室溫或50℃溫箱放置數(shù)分鐘，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除， 否則漂洗液中的乙醇會(huì)影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)如酶切、PCR等。 8、將吸附柱放入一個(gè)干凈的離心管中，向吸附膜中央懸空滴加50ul-100ul經(jīng)65℃水浴預(yù)熱的洗脫液，室溫放置5min，12000rpm離心1min。 9、離心所得洗脫液再加入吸附柱中，室溫放置2min，12000rpm離心2min，即可得到高質(zhì)量的病毒基因組DNA。 注意事項(xiàng): 1、蛋白酶K需放置-20℃保存。 2、樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融，否則會(huì)導(dǎo)致提取的DNA片段較小且提取量也下降。 3、若結(jié)合液中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解再使用，不影響效果。 4、洗脫緩沖液的體積最好不少于50ul，體積過(guò)小會(huì)影響回收效率。洗脫液的pH值對(duì)洗脫效率也有影響，若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調(diào)至此范圍)，pH 值低于7.0會(huì)降低洗脫效率。DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃，以防DNA降解。 5、DNA濃度及純度檢測(cè)：得到的基因組DNA片段的大小與病毒的保存條件和種類(lèi)等因素有關(guān)。D260值為1.0相當(dāng)于大約50 ug/ml雙鏈DNA、40 ug/ml單鏈DNA。OD260/OD280比值應(yīng)為1.7-1.9，如果洗脫時(shí)不使用洗脫緩沖液，而使用去離子水，比值會(huì)偏低，因?yàn)閜H值和離子存在會(huì)影響光吸收值，但并不表示純度低。 6、如果病毒含量過(guò)低，最后提取的基因組DNA電泳可能無(wú)法檢測(cè)到，但PCR等其他實(shí)驗(yàn)還會(huì)有結(jié)果。 |
| 性狀 | 試劑盒內(nèi)容： 50T 100T
蛋白酶K 1ml 1ml×2 結(jié)合液 25ml 50ml 漂洗液 15ml 15ml×2 洗脫液 10ml 20ml 吸附柱 50個(gè) 100個(gè) 收集管 50個(gè) 100個(gè) 說(shuō)明書(shū) 1份 1份 |
| 貯存 | 室溫(15℃-25℃) 干燥保存，復(fù)檢期12個(gè)月，2℃-8℃保存時(shí)間更長(zhǎng)。 |
- 司班40 26266-57-9
- 司班20 1338-39-2
- DNA病毒基因組提取試劑盒
- 丁二酸酐 108-30-5
- 1,2,4-苯三酸酐 552-30-7
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