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DH5α感受態細胞
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檢測信息查詢
| 貨號 | 規格 | 貨期 | 庫存 | 價格 | 會員價 | 訂購 |
| 1308111249-10×100 μl | 現貨 | 0 | ￥264 | |||
| 1308111249-20×100μl | 現貨 | 0 | ￥462 |
| 別 名 | |
| Cas號 | |
| M D L | |
| 分子式 | |
| 分子量 | |
| 產品參數 | 產品簡介：
本公司生產的DH5 α 感受態細胞是采用大腸桿菌DH5 α 菌株經特殊工藝制備得到，可用于DNA的化學轉化。使用pUC19 質粒檢測，轉化效率可達 108，-70 ℃保存3-5 個月轉化效率不發生改變。 基因型: supE44 △lacU169 （φ80 lacZ△M15 ）hsdR17 recA1 end A1 gyrA96 thi-1 relA1 特 點: 一種用于鋪制與培養質粒平板和粘粒平板的重組缺陷的抑制型菌株。其 φ80 lacZ△M15 基因的產物可與pUC 載體編碼的 β-半乳糖苷酶氨基端實現β 互補，可用于藍白斑篩選。 操作方法：（以下操作均按無菌條件的標準進行） 1 、將感受態細胞置于冰上融化，以下實驗以 100ul 感受態細胞為例。 2 、向感受態細胞懸液中加入需轉化的目的 DNA，注意目的DNA的體積不要超過感受態細胞懸液體積的十分之一，輕輕旋轉離心管以混勻內容物，冰浴放置30 分鐘。 3 、將離心管置于 42℃水浴中放置 60-90 秒，然后快速轉移到冰浴中放置 2-3 分鐘，注意不要搖動離心管。 4 、向離心管中加入 500ul 無菌無抗的SOC 或LB培養基，37℃ 180rpm 振蕩培養1 小時。目的是使質粒上相關的抗性標記基因表達，使菌體復蘇。 5 、取適量已轉化的感受態細胞涂布含相應抗生素的 SOC 或LB平板，37℃倒置培養 12-16 小時。涂布用量可根據具體實驗來調整，如轉化的DNA總量較多，可取100ul 左右的轉化產物涂板；反之，如轉化的 DNA總量較少，可取200-300ul 的轉化產物涂板。過多菌液可以抑制細菌生長。如果預計的克隆較少，可通過離心后吸除部分培養液，懸浮菌體后將其涂布于一個平板中。涂布剩余的菌液可4 ℃保存，如果次日的轉化菌落數過少，可以將剩下的菌液再涂布新的平板。 注意事項： 1、感受態細胞應保存在-70 ℃，不可反復凍融，否則其轉化效率將會降低。 2、實驗過程中應嚴格無菌操作，防止其它 DNA的污染，避免為以后的篩選、鑒定帶來影響。 3、轉化時，轉化效率與外源 DNA的濃度在一定范圍內成正比，但當加入的外源DNA量過多或體積過大反而會降低轉化效率。轉化時DNA體積要小于感受態細胞體積的十分之一。 4、轉化率的計算：轉化率＝產生菌落的總數/ 鋪板DNA總量。 5、為防止轉化實驗不成功，可以保留部分連接產物，以重新轉化，將損失降到最低。 |
| 性狀 | |
| 貯存 | -70℃保存，運輸為干冰包裝。自收貨之日起液氮保存至少一年，-70 ℃保存至少 6 個月。 |
- 戊四唑 54-95-5
- Top10感受態細胞
- 5,6-二甲基苯并咪唑(5,6-DBI) 582-60-5
- 1,2-二甲基咪唑 1739-84-0
- DH5α感受態細胞
- 6-甲氧基-2-甲基苯并噻唑 2941-72-2
- 4,5-二苯基咪唑 668-94-0
- 奧美拉唑 73590-58-6
- 3-巰基-1,2,4-三唑 3179-31-5
滬公網安備 31012002003054號