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細(xì)胞核提取試劑盒
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檢測信息查詢
| 貨號 | 規(guī)格 | 貨期 | 庫存 | 價(jià)格 | 促銷價(jià) | 訂購 |
| 1308111368-50T | 現(xiàn)貨 | 0 | ￥600 | |||
| 1308111368-100T | 現(xiàn)貨 | 0 | ￥800 |
| 別 名 | |
| Cas號 | |
| M D L | |
| 分子式 | |
| 分子量 | |
| 產(chǎn)品參數(shù) | 說明
細(xì)胞核提取試劑盒用于從動物細(xì)胞或組織中分離出完整而純化的細(xì)胞核。適合于動物軟組織（肝或腦組織）和硬組織（肌肉）以及培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞核的制備。其制備物產(chǎn)量高，可以被用于細(xì)胞凋亡、信號傳遞、代謝和蛋白組學(xué)等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶，性能穩(wěn)定。 三，操作步驟 1. 樣本處理 a. 組織勻漿：稱取100~200 mg新鮮組織如肝臟、腦、心肌等，PBS或生理鹽水沖洗，洗凈血水，濾紙吸干，用剪刀剪為碎塊放入小容量玻璃勻漿器內(nèi)。加入1.0 mL預(yù)冷的Lysis Buffer，再加入50ul Reagent A ， 0℃冰浴中上下研磨組織20次；有未研磨開的組織，可用雙層紗布過濾。 b. 培養(yǎng)細(xì)胞勻漿：消化細(xì)胞，PBS洗滌，800 × g 5~10 min離心收集細(xì)胞。計(jì)數(shù)。每次提取需要5 × 107個(gè)細(xì)胞，加入1.0 mL冰預(yù)冷的Lysis Buffer重懸細(xì)胞，再加入50ul Reagent A，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到小容量玻璃勻漿器內(nèi)，0℃冰浴研磨細(xì)胞20~30次。 2. 將組織或細(xì)胞勻漿物轉(zhuǎn)移到1.5ml離心管中，4℃，700× g 離心5 min。細(xì)胞核沉淀在收集管底部，棄上清。加入0.5 mL冰預(yù)冷的Lysis Buffer重懸沉淀； 3. 取另一新離心管內(nèi)加入0.5 mL Medium Buffer，吸取上一步的重懸液，沿管壁小心地加入到此離心管中,置于Medium Buffer之上,4℃， 700 × g 離心5min。將上清轉(zhuǎn)移到新離心管，細(xì)胞核沉淀在管底； 5. 棄上清，在細(xì)胞核沉淀中加入0.5 mL Lysis Buffer重懸細(xì)胞核沉，1000 × g 離心10min ，棄上清，得較純的細(xì)胞核沉淀； 6. 用50-100μL Store Buffer 或合適的反應(yīng)緩沖液重懸細(xì)胞核沉淀，立即使用或-70℃保存。 四 注意事項(xiàng)： 1. 為保證獲得完整的細(xì)胞核，第一是全程低溫操作。第二是快速。第三，在不破壞亞細(xì)胞器的情況下破碎細(xì)胞是制備細(xì)胞核的最關(guān)鍵環(huán)節(jié)。與組織塊相比，培養(yǎng)細(xì)胞特別是貼壁培養(yǎng)細(xì)胞在用玻璃勻漿器勻漿時(shí)較難破壁，因而要選用小容量玻璃勻漿器、間隙嚴(yán)密的研杵上下研磨培養(yǎng)細(xì)胞。 2. 以離心力g計(jì)算正確的離心速度，不同的離心機(jī)可據(jù)此精確計(jì)算離心速度。 3. 進(jìn)行Western Blot和2D-膠電泳，可直接加入上樣緩沖液裂解細(xì)胞核。 |
| 性狀 | 試劑盒組份
組份 (50T) (100T) Lysis Buffer 100mL 200mL Reagent A 2.5mL 5mL Medium Buffer 25ml 50ml Store Buffer 5mL 10mL |
| 貯存 | 四周內(nèi)使用可4℃儲存，長期置-20℃ 轉(zhuǎn)速與離心力換算 G＝1.11×(10-5)×R×[rpm]２ G為離心力，一般以ｇ（重力加速度）的倍數(shù)來表示； [rpm] ２即：轉(zhuǎn)速的平方； R為半徑，單位為厘米。 |
- 磷酸胍 5423-23-4
- 線粒體提取試劑盒
- 1,1,3,3-四甲基胍 80-70-6
- 二苯胍 102-06-7
- 細(xì)胞核提取試劑盒
- GST標(biāo)簽純化樹脂
- His標(biāo)簽純化樹脂
- 硫酸氨基胍 1068-42-4
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