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      蛋白快速銀染試劑盒

      英文名:Protein quick silver dye kits
      Cas號:
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      別 名 蛋白銀染試劑盒
      Cas號
      M D L
      分子式
      分子量
      產品參數 自備材料:
      1、 水平搖床或側擺搖床
      2、 去離子水(超純)
      3、 乙醇、冰乙酸
      操作步驟(僅供參考) :
      1、 準備工作:以下操作以8.5×5.5cm、厚度為1.0mm的凝膠為例,以凝膠全部浸沒到溶液為準,一般用量是25ml,對于凝膠體積較大的,各溶液的使用量需按凝膠體積比例放大。整個銀染過程應在搖床上進行,搖床轉速控制在60~70rpm。提前配制固定液,即按無水乙醇:冰乙酸:去離子水=5:1:4的比例配制。提前配制洗滌液,即按無水乙醇:去離子水=1:4的比例配制。
      2、 水洗:電泳結束后,取凝膠放入去離子水中清洗 2 次,每次 5min。
      3、 固定:取凝膠放入 50~100ml 固定液中,在搖床上室溫搖動 15~20min,重復固定步驟 1 次。
      4、 洗脫:取凝膠放入洗滌液中清洗 2 次,每次 5min。
      5、 水洗:去離子水清洗凝膠 2 次,每次 5min。
      6、 增敏:配制銀染增敏工作液,即取 Silver Stain Sensitizer (500×) 0.1ml 加入到 50ml 去離子水中,混勻,即 1×Silver Stain Sensitizer,一般應 2h 內用完。室溫下用 1×Silver Stain Sensitizer 孵育凝膠 2min,立即用去離子水清洗凝膠 2 次,每次 1min。
      7、 銀染: 配制銀染工作液, 即取Silver Stain(100×)0.5ml加入到50ml去離子水中, 混勻, 即得1×SilverStain,一般應 2h 內用完。取凝膠入 1×Silver Stain,在搖床上室溫搖動 10~20min。
      8、 水洗:棄液,在搖床上用去離子水清洗凝膠 2 次,每次 30s,搖動速度在 60~70rpm。總的水洗時間應控制在 1.5min 內。
      9、 顯影:配制銀染顯影工作液,即取 Silver Stain Developer(5×)10ml 加入到 40ml 去離子水中,混勻,即 1×Silver Stain Developer,一般應 30min 內用完。清洗凝膠后,立即置于 1×Silver StainDeveloper 中, 室溫孵育 2~10min, 直至蛋白條帶清晰可見。 一般顯色 30s 后就會出現棕色沉淀,繼續顯影 2~3min,亦可延長至 5min 以上,如果顯影效果不佳,可重新更換 1×Silver StainDeveloper 繼續顯影。
      10、 迅速用去離子水清洗凝膠以避免顯影過度,背景染色。立即加入銀染終止液,搖床上搖動10min,以終止顯色反應。(配制銀染終止液,即取 Silver Stain Stop Buffer(10×)10ml 加入到 40ml去離子水中,混勻,即 1×Silver Stain Stop Buffer,一般應 24h 內用完。)
      11、 保存:棄終止液,加入去離子水 50ml,搖床上搖動 2~5min,棄液。短期保存于新鮮去離子水,長期保存可以制備干膠。
      注意事項 :
      1、背景過深:①顯色時間過長;②洗滌不充分;③凝膠中殘留物質未去除干凈;④去離子水的純度過低。
      2、蛋白條帶較淺:①蛋白的半胱氨酸含量過低;②銀染后水洗時間過長;③蛋白量較低;④固定后的洗滌時間不夠,導致乙酸殘留。
      3、凝膠上出現雜質或非蛋白的印跡:①凝膠沒有被充分浸沒,應加入足量溶液;②容器沒有清洗干凈;③凝膠接觸金屬物質;④指紋或其他壓跡。
      4、本染色液呈酸性,有輕微腐蝕性,使用時請作必要防護。
      5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
      性狀 產品說明 :
      蛋白快速銀染試劑盒(Protein Fast Silver Stain Kit)是一種快速的可用于 SDS-PAGE 或非變性PAGE 等蛋白銀染染色的試劑盒,該試劑盒含有增敏步驟,可明顯降低背景。其優點還在于:

      1、操作簡單、快速;

      2、可用于 2D 凝膠的銀染,并可進行后續的質譜檢測;

      3、目的條帶清晰;

      4、不含甲醇。Protein Fast Silver Stain Kit 與 Protein Silver Stain Kit 相比,前者操作速度更快,當檢測靈敏度可能低于后者,尤其是在檢測小分子量蛋白質的時候。本試劑盒僅用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
      貯存 RT,6個月有效
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