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      臺(tái)盼藍(lán)染色液

      英文名:
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      別 名
      Cas號(hào)
      M D L
      分子式
      分子量
      產(chǎn)品參數(shù) 產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
      臺(tái)盼藍(lán)(Trypan Blue) 或稱臺(tái)盼蘭、錐蟲藍(lán),是細(xì)胞活性染料,常用于檢測(cè)細(xì)胞膜的完整性與細(xì)胞的存活率,是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中最常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一。 正常的活細(xì)胞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)完整,能夠排斥臺(tái)盼藍(lán),細(xì)胞不會(huì)被染成藍(lán)色;而喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞可被臺(tái)盼藍(lán)染成藍(lán)色。通常認(rèn)為細(xì)胞膜完整性喪失,即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡。 臺(tái)盼藍(lán)可被巨噬細(xì)胞吞噬,故可用于巨噬細(xì)胞的活體染色劑。凋亡小體也有臺(tái)盼藍(lán)拒染現(xiàn)象。臺(tái)盼藍(lán)染色后,通過顯微鏡下直接計(jì)數(shù)或顯微鏡下拍照后計(jì)數(shù),就可以對(duì)細(xì)胞存活率進(jìn)行比較精確的定量。染色時(shí)間只需3-5 分鐘,操作簡(jiǎn)單。
      使用說明:
      1. 收集細(xì)胞:
      用胰酶和/ 或EDTA 消化貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞可直接收集。收集的細(xì)胞時(shí)用 1000-2000 rpm離心1 分鐘,棄上清,制備單細(xì)胞懸液,并做適當(dāng)稀釋。
      2. 臺(tái)盼藍(lán)染色:
      細(xì)胞懸液與0.4%臺(tái)盼藍(lán)溶液以 9:1 比例混勻(終濃度 0.04% ),染色 3 分鐘 ( 染色3 分鐘時(shí)間已經(jīng)足夠,但染色時(shí)間可以更長(zhǎng)一些,但不宜超過10 分鐘) 。
      3. 細(xì)胞計(jì)數(shù):
      吸取少量經(jīng)過染色的細(xì)胞,用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。死細(xì)胞著藍(lán)色并膨大,無光澤;活細(xì)胞不著色并保持正常形態(tài),有光澤。通常要比較精確地進(jìn)行定量,每個(gè)細(xì)胞樣品至少數(shù)500 個(gè)細(xì)胞。 細(xì)胞存活率(% )= 活細(xì)胞總數(shù)/ (活細(xì)胞總數(shù)+ 死細(xì)胞總數(shù))×100%
      注意事項(xiàng):
      1. 染色時(shí)間不能太長(zhǎng),否則活細(xì)胞也會(huì)逐漸積累染料而染成顏色,使檢測(cè)結(jié)果偏低;
      2. 有潛在致癌危險(xiǎn),為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
      性狀
      貯存 4 ℃保存, 一年有效。
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