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動(dòng)物組織/細(xì)胞基因組DNA提取試劑盒
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| 貨號(hào) | 規(guī)格 | 貨期 | 庫(kù)存 | 價(jià)格 | 促銷(xiāo)價(jià) | 訂購(gòu) |
| 1308111144-50T | 現(xiàn)貨 | 0 | ¥660 | |||
| 1308111144-100T | 現(xiàn)貨 | 0 | ¥1155 |
| 別 名 | |
| Cas號(hào) | |
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| 產(chǎn)品參數(shù) | 產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
本試劑盒采用可以特異性結(jié)合DNA的離心吸附柱和獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng),提取組織和細(xì)胞的基因組DNA。 離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本公司特有新型材料,能夠高效、專(zhuān)一吸附DNA,可最大限度去除雜質(zhì)蛋白及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。 提取的基因組DNA片段大,純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠。使用本試劑盒提取的基因組DNA可用于各種常規(guī)操作,包括酶切、 PCR、文庫(kù)構(gòu)建、Southern雜交等實(shí)驗(yàn)。 操作步驟: 使用前請(qǐng)先在漂洗液中加入無(wú)水乙醇,加入休積請(qǐng)參照瓶體上的標(biāo)簽。所有離心步驟均為使用臺(tái)式離心機(jī)在室溫下離心。 1、樣品的處理: a、細(xì)胞:取1×106-1×107個(gè)懸浮培養(yǎng)細(xì)胞,12000rpm離心1min收集細(xì)胞,貼壁細(xì)胞先用胰蛋白酶消化處理,再用預(yù)冷的PBS吹打成細(xì)胞懸液,然后12000rpm離心1min收集細(xì)胞,盡量除去上清,加200ul溶液A,振蕩至徹底混勻。 b、組織:組織量不宜過(guò)大,一般不要超過(guò)25mg,可以使用勻漿器勻漿,最好用液氮研磨成粉末狀,再用預(yù)冷的PBS或無(wú)菌水充分懸浮,然后12000rpm離心1min收集細(xì)胞,盡量除去上清,加200ul溶液A,振蕩至徹底混勻。 2、向懸浮液中加入20ul 的RNase A (10mg/ml),55℃放置15min。 3、加入20ul 的蛋白酶K( 10mg /ml ),充分顛倒混勻,55℃水浴消化,細(xì)胞消化時(shí)間較短,組織消化時(shí)間較長(zhǎng),一般需要1-3個(gè)小時(shí)才能完成(鼠尾需要消化過(guò)夜)。消化期間可顛倒離心管混勻數(shù)次,直至樣品消化完全為止。消化完全的指標(biāo)是:液體清亮及粘稠。 4、加入200ul體積溶液B,充分顛倒混勻,如出現(xiàn)白色沉淀,可放置于75℃ 15-30min,沉淀即會(huì)消失,不影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如溶液未變清亮,說(shuō)明樣品消化不徹底,可能導(dǎo)致提取的DNA量少及不純,還有可能導(dǎo)致堵塞吸附柱。 5、加入200ul無(wú)水乙醇,充分混勻,此時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀,不影響DNA的提取,可將溶液和絮狀沉淀都加入吸附柱中。 6、12000rpm離心1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。 7、向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇), 12000rpm離心1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。 8、向吸附柱中加入600ul漂洗液,12000rpm離心1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。 9、12000rpm離心2min,將吸附柱敞口置于室溫或50℃溫箱放置數(shù)分鐘,目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,否則漂洗液中的乙醇會(huì)影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)如酶切、PCR等。 10、將吸附柱放入一個(gè)干凈的離心管中,向吸附膜中央懸空滴加50-200ul經(jīng)65℃水浴預(yù)熱的洗脫液,室溫放置5min,12000rpm離心2min。 11、可將離心所得洗脫液再加入吸附柱中,12000rpm離心2min,即可得到高質(zhì)量的基因組DNA。 |
| 性狀 | 試劑盒內(nèi)容: 50T 100T
RNase A 1ml 1ml×2 蛋白酶K 1ml 1ml×2 溶液A 10ml 20ml 溶液B 10ml 20ml 漂洗液 15ml 15ml×2 洗脫液 10ml 20ml 吸附柱 50個(gè) 100個(gè) 收集管 50個(gè) 100個(gè) 說(shuō)明書(shū) 1份 1份 |
| 貯存 | 室溫(15℃-25℃) 干燥保存,復(fù)檢期12個(gè)月,2℃-8℃保存時(shí)間更長(zhǎng)。 |
- 通用基因組DNA提取試劑盒
- NA-酸酐 826-62-0
- 七氟丁酸酐 336-59-4
- 動(dòng)物組織/細(xì)胞基因組DNA提取試劑盒
- 二甲基馬來(lái)酸酐 766-39-2
- 戊二酸酐 108-55-4
- 全血基因組DNA提取試劑盒
- 正已酸酐 2051-49-2
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