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      植物基因組DNA提取試劑盒

      英文名:
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      別 名
      Cas號(hào)
      M D L
      分子式
      分子量
      產(chǎn)品參數(shù) 產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

      本試劑盒采用可以特異性結(jié)合DNA的離心吸附柱和獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng)提取植物的基因組DNA。離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本公司特有新型材料,能夠高效、專(zhuān)一吸附DNA,可最大限度去除雜質(zhì)蛋白及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。提取的基因組DNA片段大,純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠。使用本試劑盒提取的植物基因組DNA可用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、文庫(kù)構(gòu)建、Southern雜交等實(shí)驗(yàn)。

      操作步驟:

      使用前先在漂洗液中加入無(wú)水乙醇,加入體積請(qǐng)參照瓶體上的標(biāo)簽。所有離心步驟均為使用臺(tái)式離心機(jī)在室溫下離心。

      1、植物組織預(yù)處理:取新鮮植物組織(不超過(guò)100mg)或干重組織(不超過(guò)20mg),于液氮中充分研磨至細(xì)粉狀,讓液氮自然揮發(fā)。

      2、將研磨好的植物組織粉末迅速轉(zhuǎn)移到預(yù)先裝有400ul溶液A、20ul RNase A(10mg/ml)和5ul β-巰基乙醇的離心管中,充分顛倒混勻,室溫放置10min。

      3、加入140ul溶液B,充分顛倒混勻,12000rpm離心10min,將上清轉(zhuǎn)移至新離心管中(約400-500ul),注意不要吸入沉淀。

      4、加入和上清相同體積的溶液C,充分顛倒混勻,再加入和溶液C相同體積的無(wú)水乙醇,此時(shí)若出現(xiàn)絮狀物,將絮狀物吹散后一起加入吸附柱中,12000rpm離心5min,棄廢液,一次加不完可分兩次加入。

      注意:如果吸附柱膜呈綠色或離心時(shí)有堵塞現(xiàn)象,可向吸附柱中加入600ul無(wú)水乙醇,并適當(dāng)延長(zhǎng)離心時(shí)間。

      5、 向吸附柱中加入600ul漂洗液(請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇),12000rpm離心1min,棄廢液,將吸附柱放回收集管。

      6、向吸附柱中加入600ul漂洗液,12000rpm離心1min,棄廢液,將吸附柱放回收集管中, 12000rpm離心2min。

      7、將吸附柱置于室溫或50℃溫箱放置數(shù)分鐘,否則殘余的乙醇可能會(huì)影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)如酶切、PCR等。

      8、將吸附柱放入一個(gè)干凈的離心管中,向吸附膜中央懸空滴加50-200ul經(jīng)65℃水浴預(yù)熱的洗脫液,室溫放置1-5min,12000rpm離心2min,即可得到高質(zhì)量的植物基因組DNA。

      9、(可選)離心所得洗脫液再加入吸附柱中,室溫放置2min,12000rpm離心2min。

      注意事項(xiàng):

      1、組織應(yīng)盡量選取新鮮幼嫩樣本,富含多糖多酚的組織可能會(huì)提取失敗,請(qǐng)選用多糖多酚專(zhuān)用試劑盒。

      2、如果試劑盒中的試劑出現(xiàn)沉淀,可在65℃水浴中融化,不影響使用。

      3、洗脫緩沖液的體積不能小于50ul,DNA產(chǎn)物應(yīng)-20℃保存。
      性狀 試劑盒內(nèi)容: 50T 100T
      RNase A 1ml 1ml×2
      β-巰基乙醇 250ul 500ul
      溶液A 20ml 40ml
      溶液B 7ml 14ml
      溶液C 30ml 60ml
      漂洗液 15ml 15ml×2
      洗脫液 10ml 20ml
      吸附柱 50個(gè) 100個(gè)
      收集管 50個(gè) 100個(gè)
      說(shuō)明書(shū) 1份 1份
      貯存 室溫(15℃-25℃) 干燥保存,復(fù)檢期12個(gè)月,2℃-8℃保存時(shí)間更長(zhǎng)。
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