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      酵母質粒提取試劑盒

      英文名:
      Cas號:
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      別 名
      Cas號
      M D L
      分子式
      分子量
      產品參數 產品簡介:本試劑盒采用酶法破碎酵母細胞壁和堿裂解法裂解酵母細胞來提取酵母質粒DNA。所采用的酵母破壁酶能有效地破壞酵母細胞壁,提高酵母質粒DNA的產量。吸附柱中采用的硅基質材料能高效、專一地吸附DNA,可最大限度去除雜質蛋白質及細胞中其他有機化合物。使用本試劑盒提取的酵母質粒DNA可適用于各種常規的分子生物學實驗,包括酶切、PCR、測序、連接和轉化等試驗。本試劑盒無需使用酚、氯仿等有毒試劑,操作安全。

      注意事項:
      1、溶液YP1在使用前先加入RNaseA(將試劑盒中提供的RNaseA 全部加入),混勻,置于2-8℃保存。
      2、第一次使用前應按照試劑瓶標簽的說明在漂洗液中加入無水乙醇配制成工作液(向15ml的漂洗液中加入60ml的無水乙醇)。3 、使用前請先檢查溶液 YP2 和溶液YP3 是否出現混濁,如有混濁現象,可在 37℃水浴中加熱幾分鐘,待溶液恢復澄清后再使用。
      4 、洗脫緩沖液體積不應少于 50ul ,體積過小影響回收效率;洗脫液的 pH值對洗脫效率也有影響,若需要用水做洗脫液應保證其pH 值在8.0 左右(可用NaOH 將水的pH 值調至此范圍),pH 值低于7.0 會降低洗脫效率;DNA產物應保存在-20℃,以防 DNA降解。
      5 、質粒得率與酵母菌株、質粒拷貝數、培養條件等因素有關。通常酵母質粒拷貝數都很低,一般通過電泳或分光光度計法都很難檢測到,可通過PCR 或轉化大腸桿菌來檢測。
      6 、DNA濃度及純度檢測:得到的基因組DNA片段的大小與樣品保存時間、操作過程中的剪切力等因素有關。回收得到的DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。DNA應在OD260處有顯著吸收峰, OD260值為1 相當于大約50 μg/ml 雙鏈DNA、40 μ g/ml 單鏈DNA。OD260/OD280比值應為1.7-1.9 ,如果洗脫時不使用洗脫緩沖液,而使用去離子水,比值會偏低,因為pH值和離子存在會影響光吸收值,但并不表示純度低。
      性狀 試劑盒組成 50T 100T
      RNase A 300ul 500ul
      酵母破壁酶 1.25ml 1.25ml×2
      山梨醇Buffer 25ml 50ml
      β-巰基乙醇 300ul 600ul
      溶液YP1 15ml 30ml
      溶液YP2 15ml 30ml
      溶液YP3 20ml 40ml
      漂洗液 15ml 15ml×2
      洗脫液 15ml 30ml
      吸附柱 50個 100個
      收集管 50個 100個
      說明書 1份 1份
      貯存
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