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質(zhì)粒大量提取試劑盒
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檢測信息查詢
| 貨號 | 規(guī)格 | 貨期 | 庫存 | 價(jià)格 | 促銷價(jià) | 訂購 |
| 1308111176-10T | 現(xiàn)貨 | 0 | ￥495 |
| 別 名 | |
| Cas號 | |
| M D L | |
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| 分子量 | |
| 產(chǎn)品參數(shù) | 產(chǎn)品說明：
本試劑盒采用堿裂解法裂解細(xì)胞，根據(jù)離心吸附柱在高鹽狀態(tài)下特異性地結(jié)合溶液中的DNA的原理特異性提取質(zhì)粒DNA。 離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料能高效、專一地吸附DNA，可最大限度去除雜質(zhì)蛋白及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物，一般從50-100ml大腸桿菌LB培養(yǎng)液中，可快速提取200-300μg高純度高拷貝的質(zhì)粒DNA，提取率達(dá)85-90%。 使用本試劑盒提取的質(zhì)粒DNA可適用于各種常規(guī)操作，包括酶切、PCR、測序、連接和轉(zhuǎn)化等試驗(yàn)。 注意事項(xiàng)： 1、溶液Ⅰ在使用前先加入RNaseA(將試劑盒中提供的RNaseA 全部加入)，混勻，置于2-8℃保存。 2、第一次使用前應(yīng)按照試劑瓶標(biāo)簽的說明在漂洗液中加入無水乙 醇配制成工作液(向15ml的漂洗液中加入60ml的無水乙醇。 3、使用前請先檢查溶液Ⅱ和溶液Ⅲ是否出現(xiàn)混濁，如有混濁現(xiàn)象 可在37℃水浴中加熱幾分鐘，待溶液恢復(fù)澄清后再使用。 4、溶液Ⅱ、溶液Ⅲ和漂洗液使用后應(yīng)立即蓋緊蓋子，如非指明，所有離心步驟均為使用臺(tái)式離心機(jī)室溫下進(jìn)行離心。 5、如果是提取革蘭氏陽性菌質(zhì)粒，必須在裂解細(xì)胞前破細(xì)胞壁，方法如下：收集適量菌體，加入5ml溶液Ⅰ，充分懸浮菌體，加入溶菌酶至終濃度為10-20mg/ml，37℃處理30min左右。加入溶菌酶的濃度和處理時(shí)間可根據(jù)不同的菌株和具體試驗(yàn)條件進(jìn)行調(diào)整。還可以選擇D1120、D1130革蘭氏陽性菌質(zhì)粒提取試劑盒。 6. 洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于500ul，體積過小影響回收效率；洗脫液的pH值對洗脫效率也有影晌，若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調(diào)至此范圍)， pH值低于7. 0會(huì)降低洗脫效率。 DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃，以防DNA降解。 7. 如果所提質(zhì)粒為低拷貝質(zhì)粒或大于10kb的大質(zhì)粒，應(yīng)加大菌體使用量，使用400-800ml過夜培養(yǎng)物，同時(shí)按照比例增加溶液Ⅰ 、溶液Ⅱ和溶液Ⅲ的用量，吸附和洗脫時(shí)可以適當(dāng)?shù)难娱L時(shí)間，以增加提取效率。 8. DNA濃度及純度檢測：得到的質(zhì)粒DNA純度與樣品保存時(shí)間、操作過程中的剪切力等因素有關(guān)。 得到的DNA可用瓊脂糖疑膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測濃度與純度。 DNA應(yīng)在OD260處有顯著吸收峰，OD260值為1相當(dāng)于大約50μg/ml雙鏈DNA、 40μg/ml單鏈DNA。OD260/OD280比值應(yīng)為1.7-1.9，如果洗脫時(shí)不使用洗脫緩沖液，而使用去離子水，比值會(huì)偏低，因?yàn)閜H值和離子存在會(huì)影響吸光值，但并不表示純度低。 |
| 性狀 | 試劑盒內(nèi)容：
RNaseA ( 10mg/ml ) 1ml 溶液Ⅰ 60ml 溶液Ⅱ 60ml 溶液Ⅲ 80ml 漂洗液 2×15ml 洗脫液 30ml 吸附柱 10個(gè) 收集管(50ml) 10個(gè) 說明書 1份 |
| 貯存 | 常溫保存，復(fù)檢期一年。 |
- 檸康酐 616-02-4
- 無內(nèi)毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒
- 革蘭氏陽性菌質(zhì)粒大量提取試劑盒
- 順式六氫苯酐 13149-00-3
- 質(zhì)粒大量提取試劑盒
- 氯化偏苯三酸酐 1204-28-0
- 聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒
- 1,1-環(huán)己基二乙酸酐 1010-26-0
- 苯亞硒酸酐 17697-12-0
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