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      細胞凋亡-Hoechst33258染色試劑盒

      英文名:Apoptosis - Hoechst33258 dye kits
      Cas號:
      檢測信息查詢
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      13081168431 100T 現(xiàn)貨 0 ¥1599
      - +
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      別 名
      Cas號
      M D L
      分子式
      分子量
      產(chǎn)品參數(shù) 注意事項:

      1、 熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡快檢測。使用抗熒封片劑時也應(yīng)避光操作。

      2、 在為了獲得細胞沉淀的離心的過程中,對于特殊細胞,如果細胞沉淀不充分,可以適當(dāng)提高離 心力或延長離心時間。

      3、 Hoechst 33258染色液對人體有一定刺激性,請注意適當(dāng)防護。 4、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
      性狀 快速簡便的細胞凋亡檢測 ,由固定液、染色液、熒光封片劑組成,貼壁細胞,適用于懸浮細胞和組織切片。



      細胞凋亡-Hoechst染色試劑盒(Hoechst Staining Kit)是一種采用經(jīng)典的Hoechst33258進行細胞凋 亡檢測的快速簡便的試劑盒。當(dāng)細胞發(fā)生凋亡時,染色質(zhì)會固縮,Hoechst33258 染色后在熒光顯微 鏡下觀察,正常細胞的細胞核呈正常的藍色,而凋亡細胞的細胞核會呈致密濃染,或呈碎塊狀致密 濃染,顏色有些發(fā)白。Hoechst Staining Kit 經(jīng)常用于培養(yǎng)的貼壁或懸浮細胞以及組織切片的細胞凋 亡檢測。該試劑盒檢測細胞含量范圍一般為 0.1~1×106之間。
      1、 可觀察藍光的熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡

      2、 PBS或生理鹽水

      3、 載玻片、蓋玻片

      4、 預(yù)冷固定液:預(yù)冷的70%乙醇或4%多聚甲醛
      (僅供參考):

      (一)貼壁細胞

      1、取潔凈蓋玻片在70%乙醇中浸泡5min或更長時間,無菌超凈臺內(nèi)吹干或用無菌的PBS或生理鹽水 洗滌3次,再用細胞培養(yǎng)液洗滌1次。將蓋玻片置于6孔板或其他培養(yǎng)皿內(nèi),接種細胞培養(yǎng)過夜, 使融合率約為50%~80%。

      2、加入干預(yù)條件使細胞發(fā)生凋亡后,吸盡培養(yǎng)液,加入Hoechst固定液0.5ml,固定10min或更長時 間(可4℃過夜)。

      3、去除固定液,用PBS或生理鹽水洗2次,每次3min,吸盡液體。洗滌時宜用搖床,或手動晃動。

      4、加入Hoechst 33258染色液0.5ml,孵育5min。也宜用搖床,或手動晃動數(shù)次。

      5、棄染色液,用PBS或生理鹽水洗2次,每次3min,吸盡液體。洗滌時宜用搖床,或手動晃動。

      6、滴一滴抗熒封片劑于載玻片上,蓋上貼有細胞的蓋玻片,讓細胞接觸封片劑,盡量避免氣泡。

      7、熒光顯微鏡可檢測到呈藍色的細胞核。激發(fā)波長350nm左右,發(fā)射波長460nm左右。

      (二)懸浮細胞

      1、離心收集細胞樣品于1.5ml離心管內(nèi)并棄液,加入Hoechst固定液0.5ml,緩緩懸起細胞,固定10min 或更長時間(亦可4℃過夜)。

      2、低速離心去除固定液,用PBS或生理鹽水洗2次,每次3min。洗滌時手動晃動數(shù)次

      3、低速離心離心后吸去大部分液體保留約50μl液體,再緩緩懸起細胞,滴加至載玻片上,盡量使細 胞分布均勻。

      4、稍晾干,使細胞貼在載玻片上不易隨液體流動。

      5、滴加Hoechst 33258染色液0.5ml,孵育5min。用吸水紙從邊緣吸去液體,微晾干。

      6、棄染色液,用PBS或生理鹽水洗2次,每次3min,吸盡液體。洗滌時宜用搖床,或手動晃動。

      7、滴一滴抗熒光封片劑于載玻片上,蓋上一潔凈的蓋玻片,盡量避免氣泡。

      8、熒光顯微鏡可檢測到呈藍色的細胞核。激發(fā)波長350nm左右,發(fā)射波長460nm左右。

      (三)組織切片

      1、常規(guī)包埋切片。

      2、用PBS或生理鹽水洗2次,每次3min。洗滌時手動晃動數(shù)次。

      3、均勻滴上Hoechst 33258染色液0.5ml,孵育5分鐘。

      4、棄染色液,用PBS或生理鹽水洗2次,每次3min,吸盡液體。洗滌時宜用搖床,或手動晃動。

      5、 將切片置于載玻片上,滴一滴抗熒光封片劑,蓋上一潔凈的蓋玻片,盡量避免氣泡。

      6、熒光顯微鏡可檢測到呈藍色的細胞核。激發(fā)波長350nm左右,發(fā)射波長460nm左右。
      貯存 —20℃,避光,12個月
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