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吖啶橙(AO)熒光染色試劑盒
英文名:Acridine orange (AO) fluorescence staining kits
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| 貨號 | 規格 | 貨期 | 庫存 | 價格 | 促銷價 | 訂購 |
| 13081168441 | 100T | 現貨 | 0 | ¥888 |
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| 產品參數 | 自備材料:
1、 熒光顯微鏡 2、 低速離心機 3、 PBS 4、 細胞計數板 5、 載玻片、蓋玻片 操作步驟(僅供參考): (一) AO單獨染色 1、 收集細胞(采用流式細胞儀檢測時,應先固定細胞),用AO Stain Buffer(1×)清洗細胞1次,加入適量的AO Stain Buffer(1×)重懸細胞,計數并調節細胞濃度至106/ml。 2、 取適量的細胞懸液和AO Stain,按照細胞懸液:AO Stain=19:1的比例混合,輕輕混勻。如果采用熒光顯微鏡下觀察,一般取95μl細胞懸液和5μl AO Stain混合即可。 3、 室溫避光染色15min,滴加于載玻片上并加蓋玻片或上流式細胞儀分析。 4、 熒光顯微鏡下觀察(激發濾光片波長488nm,阻斷濾光片波長515nm),計數并拍照。 染色結果: 正常細胞 細胞被均勻染成黃綠色熒光 凋亡細胞 染色質濃縮,細胞核碎裂成點狀,被染成大小不一、致密濃染的綠色顆粒 (二) AO/EB雙染色 1、 收集細胞,用AO Stain Buffer(1×)清洗細胞1次,加入適量的AO Stain Buffer(1×)重懸細胞,計數并調節細胞濃度至106/ml。 2、 取適量的細胞懸液和AO Stain,按照細胞懸液:AO Stain=19:1的比例混合,并加入適量EB染色液,輕輕混勻。如果采用熒光顯微鏡下觀察,一般取95μl細胞懸液和5μl AO Stain混合即可。 3、 室溫避光染色15min,滴加于載玻片上并加蓋玻片 4、 熒光顯微鏡濾光片515nm觀察,計數并拍照。 染色結果: 正常細胞 均勻染成綠色熒光 壞死細胞 細胞桔黃色熒光 凋亡細胞 染色質濃縮,細胞核碎裂,被染成大小不一、致密濃染的黃綠色顆粒或見胞質芽狀突起。 計算細胞凋亡率和死亡率: 細胞死亡率=凋亡細胞/細胞總數×100% 細胞壞死率=壞死細胞/細胞總數×100% 注意事項: 1. 吖啶橙染色常不EB染色合用,可區分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞。 2. 如有低溫離心機進行離心效果更佳,同時應注意減少試劑暴露于強光下的時間。 3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 |
| 性狀 | 產品說明:
吖啶橙(Acridine Orange,AO)屬于三環雜芳香燃料,可以標記DNA、RNA,屬于異染性熒光染料。該染料具有膜通透性,能透過細胞膜,使核DNA和RNA染色。因此AO常用于細胞內DNA和RNA進行檢測。AO與核酸結合方式主要有:1、插入性結合,AO嵌入核酸雙鏈的堿基對之間,這種結合方式主要為AO與DNA的結合,其熒光發射峰為530nm,激發后呈綠色熒光;2、靜電吸引,帶正電荷的AO與單鏈核酸的磷酸根(帶負電荷)產生靜電間的吸引結合,這種結合方式主要為AO與RNA的結合,其熒光發射峰為640nm,激發后呈紅色熒光,少量結合會呈桔黃色或桔紅色熒光。因此,吖啶橙嵌合到雙鏈DNA分子中顯綠色,與DNA單鏈或RNA結合時發桔黃色或橙紅色熒光。 吖啶橙染色試劑盒(Acridine Orange Detection Kit)主要由AO Stain、AO Stain Buffer組成,常用于細胞凋亡的檢測。染色后在熒光顯微鏡下觀察,吖啶橙可透過正常細胞膜,使細胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光;而在凋亡細胞中,因染色質固縮或斷裂為大小不等的片斷,形成凋亡小體。吖啶橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光或黃綠色碎片顆粒;而壞死細胞黃熒光減弱甚至消失。吖啶橙染色常與EB染色合用雙染,EB只染死細胞使之產生桔黃色熒光,由此可區分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞。 |
| 貯存 | 4℃,避光,6個月有效。 |
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