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酵母基因組DNA提取試劑盒
英文名：
Cas號：
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檢測信息查詢
| 貨號 | 規格 | 貨期 | 庫存 | 價格 | 促銷價 | 訂購 |
| 1308111149-50T | 現貨 | 0 | ￥660 | |||
| 1308111149-100T | 現貨 | 0 | ￥1155 |
| 別 名 | |
| Cas號 | |
| M D L | |
| 分子式 | |
| 分子量 | |
| 產品參數 | 產品簡介：
本試劑盒采用可以特異性結合DNA的離心吸附柱和獨特的緩沖液系統，提取酵母基因組DNA。離心吸附柱中采用的硅基質材料為本公司特有新型材料，能夠高效專一吸附DNA，可最大限度去除雜質蛋白及細胞中其他有機化合物。提取的基因組DNA片段大，純度高，質量穩定可靠。使用本試劑盒提取的基因組DNA可用于各種常規操作，包括酶切、 PCR、文庫構建、Southern雜交等實驗。 操作步驟： 使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶體上的標簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。 1、取酵母細胞(不超過5×107 ce l1 s)，12000rpm離心1min，盡量吸除上清。 2、酵母細胞壁的破除：向酵母菌體中加入470ul山梨醇Buffer。充分懸浮菌體，加入25ul酵母破壁酶和5ul β-巰基乙醇，充分混勻。30℃處理1-2h，期間可顛倒離心管混勻數次。 3、12000rpm離心lmin，棄上清，收集沉淀。 4、向沉淀中加入200ul溶液A，充分懸浮沉淀，向懸浮液中加入20ul的RNase A(10mg/ml)，充分顛倒混勻，室溫放置10min。 5、加入20ul的蛋白酶K(10mg/ml)，充分顛倒混勻。65℃水浴消化15-30min，消化期間可顛倒離心管混勻數次，直至樣品消化完全為止。 6、加入200ul溶液B，再加入200ul無水乙醇，充分顛倒混勻，此時可能會出現絮狀沉淀，不影響DNA的提取，可將溶液和絮狀沉淀都加入吸附柱中，室溫放置2min。 7、12000rpm離心2min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。 8、向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前請先檢查是否己加入無水乙醇)。12000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。 9、向吸附柱中加入600ul漂洗液， 12000rpm離心l min， 棄廢液，將吸附柱放入收集管中。 10、12000rpm離心2min，將吸附柱敞口置于室溫或50℃溫箱放置數分鐘，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除，否則漂洗液中的乙醇會影響后續實驗如酶切、PCR等。 11、將吸附柱放入一個干凈的離心管中，向吸附膜中央懸空滴加50-200ul經65℃水浴預熱的洗脫液，室溫放置5min，12000rpm離心l min。 12、離心所得洗脫液再加入吸附柱中，12000rpm離心2 min，即可得到高質量的基因組DNA。 注意事項： 1、樣品應避免反復凍融，否則會導致提取的DNA片段較小且提取量下降。 2、若試劑盒中的溶液出現沉淀，可在65℃水浴中重新溶解后再使用，不影響提取效果。 3、如果實驗中的離心步驟出現柱子堵塞的情況，可適當延長離心時間。 4、洗脫緩沖液的體積最好不少于50ul，體積過小會影響回收效率；洗脫液的pH值對洗脫效率也有影響，若需要用水做洗脫液應保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調至此范圍)， pH值低于7. 0會降低洗脫效率。DNA產物應保存在-20℃，以防DNA降解。 5、 DNA濃度及純度檢測：得到的基因組DNA片段的大小與樣品保存時間、操作過程中的剪切力等因素有關。 回收得到的DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。DNA應在OD260處有顯著吸收峰，OD260值為1.0相當于大約50μg/ml雙鏈DNA、40μg/ml單鏈DNA。OD260/0D280比值應為1.7-1.9，如果洗脫時不使用洗脫緩沖液，而使用去離子水，比值會偏低，因為pH值和離子存在會影響光吸收值，但并不表示純度低。 |
| 性狀 | 試劑盒內容： 50T 100T
RNase A 1m1 1ml×2 蛋白酶K 1ml 1ml×2 酵母破壁酶 1. 25m1 1.25m1×2 β-巰基乙醇 300ul 600ul 山梨醇Buffer 25m1 50m1 溶液A 10ml 20ml 溶液B 10ml 20ml 漂洗液 15m1 15ml×2 洗脫液 10m1 20m1 吸附柱 50個 100個 收集管 50個 100個 說明書 1份 1份 |
| 貯存 | 室溫(15℃-25℃) 干燥保存，復檢期12個月，2℃-8℃保存時間更長 |
- 二甲基馬來酸酐 766-39-2
- 戊二酸酐 108-55-4
- 全血基因組DNA提取試劑盒
- 正已酸酐 2051-49-2
- 酵母基因組DNA提取試劑盒
- 二亞乙基三胺五乙酸二酐 23911-26-4
- 十二烷二酸 693-23-2
- 全血基因組DNA提取系統
滬公網安備 31012002003054號